В процессе очистки продуктов на основе антител важным и сложным этапом является осветление после инактивации вирусов при низком pH. Жидкость на этом этапе обычно характеризуется высокой мутностью, высокой вязкостью и сложным составом примесей. В частности, остатки белков клеток-хозяев (HCP) не только влияют на срок службы сорбентов, но и напрямую влияют на чистоту, безопасность и эффективность конечных продуктов.
Почему HCP трудно удалить и как добиться эффективного осветления и одновременно удалить HCP?
Белки клеток-хозяев (HCP) — это примесные белки, продуцируемые клетками-хозяевами во время экспрессии антител. Эти белки отличаются большим разнообразием и значительными различиями в физико-химических свойствах (таких как молекулярная масса, изоэлектрическая точка и гидрофобность). Некоторые HCP имеют очень схожие физико-химические свойства с целевым антителом, что делает их специфическое отделение особенно сложной задачей.
С ростом популярности технологии культивирования клеток высокой плотности начальная концентрация HCP в культуральной жидкости значительно возросла. Даже после эффективных этапов очистки абсолютное количество остатков может по-прежнему влиять на последующие процессы и качество продукта. Особенно после инактивации вирусов при низком pH резкие изменения в среде раствора могут легко вызвать агрегацию или денатурацию HCP, образуя частицы различного размера или коллоидные осадки, которые значительно усложняют фильтрацию с целью очистки.
Если остаточные HCP не будут полностью удалены, они могут вызвать иммуногенные реакции, что поставит под угрозу безопасность и долгосрочную стабильность продукта.
В ответ на эту проблему компания Cobetter запускает глубинные фильтры Claricap® 0102XS, обеспечивающие эффективные решения для очистки. Глубинный фильтр Cobetter Claricap® 0102XS, специально разработанный для сложных жидких сред в биотехнологических процессах, использует уникальную формулу и структуру с градиентным размером пор. Он демонстрирует хорошие фильтрационные характеристики и отличную способность удерживать примеси на этапе осветления после низкого pH, что позволяет эффективно удалять HCP.
Недавно мы оценили Claricap® 0102XS в нескольких процессах для проектов [mAb/биспецифических антител]. Результаты следующие:
Пример из практики 1
Пример из практики 2
Пример из практики 3
После обработки с низким pH материал с мутностью 250-300 NTU был использован для оценки и сравнения трех различных серий глубинных фильтров Cobetter. Данные приведены ниже:
Основные преимущества использования глубинных фильтров Cobetter Claricap® 0102XS
Более высокая степень удаления HCP:
После фильтрации с помощью Claricap® 0102XS содержание HCP в жидкости с низким pH значительно снижается, достигая средней степени удаления более 90 %. Это значительно облегчает процесс очистки на последующих этапах хроматографии.
Отличный поток и емкость:
Claricap® 0102XS демонстрирует производительность до 200 л/м² для материалов с высоким содержанием твердых частиц, обеспечивая экономическую эффективность при крупномасштабном производстве.
Превосходное качество фильтрата:
Для жидкости с высокой мутностью (>200 NTU) мутность после фильтрации снижается до <10 NTU, что обеспечивает высокое качество входного сырья для последующих процессов. Кроме того, фильтр демонстрирует низкую связываемость с целевыми антителами, что эффективно обеспечивает высокий выход продукта.
Каков механизм фильтрации, лежащий в основе эффективного улавливания HCP глубинными фильтрами?
Cobetter Claricap® 0102XS использует многоуровневую конструкцию глубинной фильтрации, которая эффективно улавливает HCP посредством физической адсорбции и электрохимических взаимодействий:
Механизм физического удержания:
Многослойная волокнистая матрица образует многомерную сетчатую структуру, которая точно улавливает частицы различного размера (включая денатурированные агрегаты HCP).
Высокая способность удерживать загрязнения:
Структура с градиентной плотностью позволяет последовательно удерживать примеси с различными размерами частиц, эффективно препятствуя загрязнению мембраны и значительно увеличивая емкость.
Точная адсорбция примесей:
Специально разработанный фильтрующий материал обладает высокой селективной адсорбционной способностью в отношении HCP и других примесей. Кроме того, специфические адсорбционные материалы с высокой аффинностью к распространенным компонентам HCP (таким как фосфолипазы, гистоны и т. д.) обеспечивают целевое удаление.
Применение глубинных фильтров Claricap® 0102XS
- Очистка после инактивации вирусов при низком pH для биофармацевтических препаратов, таких как mAb и биспецифические антитела
- Дополнительная фильтрация для процессов с высоким риском остатков HCP
- Модернизация Downstream процесса для достижения более высокой чистоты
Заключение
Cobetter Claricap® 0102XS — это не просто высокоэффективный глубинный фильтр, но и стратегический партнер в оптимизации downstream этапа и повышении качества продукции. Его уникальная конструкция обеспечивает эффективное разделение твердых и жидких веществ и глубокое удаление примесей. Это значительно повышает чистоту и безопасность продуктов на основе антител, делая его идеальным решением для сложных процессов.
Внедрив Claricap® 0102XS на этапе очистки после низкого pH, вы достигнете следующих результатов:
- Повышенная эффективность очистки: снижение нагрузки на хроматографические колонки последующих этапов, увеличение срока службы сорбента и снижение производственных затрат.
- Гарантированное качество продукта: эффективный контроль критических примесей, таких как HCP, снижение рисков иммуногенности в конечном продукте.
- Оптимизированный технологический процесс: одновременное осветление и первичная очистка посредством одноступенчатой фильтрации, упрощение операций и повышение эффективности производства.