PVDF мембраны для вестерн-блоттинга: анализ применения

Мембраны для переноса из поливинилиденфторида (ПВДФ) широко используются в экспериментах по вестерн-блоттингу в качестве надёжного решения для переноса и обнаружения белков. В этой статье мы приводим три примера исследований, демонстрирующих эффективность мембран из ПВДФ от Cobetter в экспериментах по вестерн-блоттингу.

Мембрана из поливинилиденфторида (ПВДФ) — это синтетический фторполимерный термопласт, состоящий из повторяющихся звеньев винилиденфторида (–CH₂–CF₂–). Благодаря своей природной гидрофобности, химической стойкости и механической прочности он является идеальным материалом для иммобилизации белков при вестерн-блоттинге.

В экспериментах по вестерн-блоттингу мембраны PVDF (поливинилиденфторидные мембраны) служат важным звеном, соединяющим перенос белка и иммунодетекцию. Их основная функция заключается в эффективной иммобилизации белков, перенесенных из гелей, обеспечивая стабильную поддержку для специфического связывания первичных и вторичных антител и надежного обнаружения сигналов.

Хотя нитроцеллюлозные мембраны (NC) также широко используются в вестерн-блоттинге, мембраны PVDF обладают рядом преимуществ, которые делают их предпочтительным выбором во многих областях применения.

Мембраны для переноса из PVDF обладают более высокой способностью связывать белки и более высокой прочностью, что позволяет многократно снимать пленку и проводить повторные операции без существенной потери белка. Их химическая стойкость и механическая прочность снижают риск разрыва или скручивания при работе. Кроме того, мембраны для переноса PVDF совместимы с более широким спектром методов обнаружения, включая хемилюминесцентное, флуоресцентное и колориметрическое окрашивание.

Мембраны Cobetter из PVDF с точным контролем размера пор, высокой способностью связывать белки и экономичностью стали надежным выбором для экспериментов с вестерн-блоттингом. Они особенно хорошо подходят для таких задач, как обнаружение белков в малых количествах и многократное проведение операций, что делает их идеальными для лабораторий, которым нужны высококачественные результаты.

Команда Баошэна Го и Цин Цзяна из Медицинской школы Нанкинского университета/Больницы Нанкинской барабанной башни опубликовала свою работу «Повышенная экспрессия SIRT3 восстанавливает механизм контроля качества митохондрий, что приводит к обратному развитию остеогенных нарушений при сахарном диабете 2-го типа» в журнале Bone Research (импакт-фактор: 15). В этом исследовании изучалась фундаментальная регуляторная роль SIRT3 в контроле качества митохондрий, расширялось понимание молекулярных механизмов, лежащих в основе диабетического остеопороза, и SIRT3 был определен как перспективная терапевтическая мишень для лечения этого заболевания. В своих экспериментах по вестерн-блоттингу авторы использовали PVDF-мембраны Cobetter. (Образцы белка были разделены с помощью SDS-PAGE и перенесены на PVDF-мембраны (Cobetter).)

Результаты показали, что мембраны Cobetter PVDF хорошо справляются с обнаружением белков как цитоплазматической, так и ядерной фракций, охватывая диапазон молекулярной массы от 16 до 129 кДа.

— Xian Y, Liu B, Shen T и др. Повышенная экспрессия SIRT3 восстанавливает митохондриальный механизм контроля качества, позволяющий обратить вспять остеогенные нарушения при сахарном диабете 2 типа[J].Исследование костей, 2025, 13(1). DOI:10.1038/s41413-024-00399-5.

Профессор Далин Ху из Южного медицинского университета совместно с профессором Цзыцюанем Лу из Шэньчжэньского центра по контролю и профилактике заболеваний опубликовали свою работу в журнале ECOTOXICOLOGY AND ENVIRONMENTAL SAFETY (IF: 6,1). Исследование под названием «Экзосомы, полученные из мезенхимальных стволовых клеток пуповины человека, ослабляют токсическое воздействие свинца на клетки HK-2, регулируя реакцию на развернутый белок» показало, что экзосомы, полученные из мезенхимальных стволовых клеток пуповины человека (hucMSC-экзосомы), могут снижать токсичность свинца в клетках HK-2, модулируя реакцию на развернутый белок (UPR). Было обнаружено, что PERK играет ключевую роль в этом процессе, что подчеркивает его потенциал в качестве терапевтической мишени при лечении токсического воздействия свинца.

В этом исследовании авторы использовали мембрану Cobetter из PVDF толщиной 0,45 мкм вместе с полусухой системой переноса для блоттинга белков. (Мембрана из поливинилиденфторида (PVDF, Cobetter, Китай), Отделенные белки были электрофоретически перенесены на мембраны из PVDF толщиной 0,45 мкм с использованием полусухой системы переноса.)

Результаты показали, что PVDF-мембрана Cobetter толщиной 0,45 мкм хорошо переносит белки массой от 19 до 140 кДа, а также в полусухих условиях переноса.

— Хе Дж., Ху З., Гао З. и др. Экзосомы, полученные из мезенхимальных стволовых клеток пуповины человека, уменьшают токсическое воздействие свинца на клетки HK-2, регулируя реакцию развернутого белка. Ecotoxicol Environment Saf. 2025. DOI: 10.1016/j.ecoenv.2025.119006.

Профессор Хунбинь Хэ и его команда из Шаньдунского педагогического университета опубликовали результаты своего исследования в журнале Veterinary Microbiology (IF: 2,7). В статье под названием «SSBP1 способствует репликации вируса бычьей эфемерной лихорадки, подавляя противовирусные иммунные реакции посредством деградации MAVS» показано, что митохондриальный одноцепочечный ДНК-связывающий белок 1 (SSBP1) может ограничивать активацию врождённого иммунитета, вызванную вирусом бычьей эфемерной лихорадки, посредством сигнального пути SSBP1–Smurf1–MAVS, что подчёркивает его потенциал в качестве терапевтической мишени при вирусных инфекциях.

В этой работе авторы использовали PVDF-мембрану Cobetter толщиной 0,45 мкм. (Равные количества белков добавляли с 5-кратным буфером для загрузки образцов SDS-PAGE и затем разделяли на 10 % и 12,5 % гели SDS-PAGE, а затем переносили на поливинилидендифторидные (PVDF) мембраны (оборудование для фильтрации Cobetter, Китай).)

Результаты показали, что PVDF-мембрана Cobetter толщиной 0,45 мкм обеспечивает получение четких белковых полос на чистом фоне, демонстрируя надежную работу.

— Ли Х, Сонг Х, Ма Х и др. SSBP1 способствует репликации вируса эфемерной лихорадки крупного рогатого скота, противодействуя противовирусным иммунным реакциям посредством деградации MAV[J]. Ветеринарная микробиология, 2025: 110684.

Мембраны Cobetter из поливинилиденфторида сочетают в себе высококачественные материалы, точный контроль размера пор и высокую способность связывать белки с превосходной экономической эффективностью, обеспечивая надёжную поддержку при проведении вестерн-блоттинга. Три тематических исследования демонстрируют их универсальность в отношении различных типов белков, источников образцов и условий проведения экспериментов. Предоставляя исследователям надёжные и удобные в использовании продукты, компания Cobetter и Alianbio продолжают поддерживать научную деятельность и стремятся развиваться вместе с нашими пользователями и партнёрами.

Cobetter PVDF мембрана для переноса
Тип	Гидрофобная
Размер пор	0.2μm	0.45μm
Толщина	130μm	125μm
Удержание	Целевой белок <20 kDa	Широкий диапазон молекулярного веса
Особенность	Высокая чувствительность и низкий уровень шума, высокая механическая прочность
Размер	Рулон: 275 мм * 3,75 м; Предварительно нарезанный лист: 84 мм * 70 мм; 150 мм * 150 мм; 200 мм * 200 мм…