Эритропоэтин (ЭПО), известный как фактор, стимулирующий образование эритроцитов, выполняет следующие основные биологические функции: подавляет апоптоз миелоцитов, стимулирует высвобождение ретикулоцитов в кровоток и стимулирует синтез белка в клетках. Это основной фактор роста гемопоэза, отвечающий за пролиферацию, дифференцировку и поддержание нормального количества эритроцитов в периферической крови. Рекомбинантный человеческий эритропоэтин (рчЭПО) и природный эритропоэтин (ЭПО) имеют очень похожую структуру, с небольшими различиями в связи с сиаловой кислотой. В клинической медицине рекомбинантный рЭПО в основном используется для лечения анемии, вызванной почечной недостаточностью, анемии у пациентов со СПИДом, анемии, связанной со злокачественными опухолями, и других заболеваний.
Процесс получения рЭПО
В настоящее время мы в основном используется технология генной инженерии для рекомбинации гена ЭПО in vitro и введения его в клетки CHO. Клетки CHO культивируются для экспрессии, а затем очищаются в несколько этапов для получения рекомбинантного человеческого эритропоэтина (рЭПО). Использование клеток CHO в качестве переносчика для производства rhEPO сопряжено с потенциальным риском вирусной контаминации.
В соответствии нормативными актами и руководствами, действующими в стране и за рубежом, разработка и проведение исследований по обезвреживанию вирусов в рамках одного и того же производственного процесса требуют использования различных методов инактивации или удаления вирусов, чтобы гарантировать, что биологические продукты не несут в себе потенциального риска заражения вирусами при использовании для лечения или профилактики заболеваний. Хроматография и нанофильтрация могут быть эффективными методами удаления вирусов, при этом фильтрация для удаления вирусов не изменяет первоначальные физические и химические свойства материала и обеспечивает высокий уровень удаления LRV, что делает её идеальным методом для борьбы с вирусными загрязнениями.
Процессная фильтрация EPO с помощью фильтров для удаления вирусов Cobetter
Пример 1.
Условия:
- Тестовая фильтрация с EPO 1,59/л
- Предварительная фильтрация с помощью префильтров PTD и PNY по отдельности
- Предварительно отфильтрованные образцы тестируются Cobetter Viruclear VF Plus при давлении 30 фунтов на квадратный дюйм
Результаты
→PDT+VF Plus, коэффициент извлечения 97,7%
→PNY+VF Plus, коэффициент извлечения 99,2%
Пример 2.
Условия
- Фильтрация с помощью 49/L EPO
- Предварительная фильтрация с помощью префильтров PTD и PNY по отдельности
- Предварительно отфильтрованные образцы тестируются с помощью Cobetter Viruclear VF Plus при давлении 30 фунтов на квадратный дюйм
Результаты
→PDT+VF Plus, коэффициент извлечения 97,3%
→PNY+VF Plus, коэффициент извлечения 99,0%
Пример 3.
Тестовая фильтрация при 89/L EPO
Две группы тестов
- Предварительная фильтрация с помощью PTD. Предварительно отфильтрованные образцы тестируются с помощью Cobetter Viruclear VF Plus при давлении 30 фунтов на квадратный дюйм
- Предварительная фильтрация с помощью PNY. Предварительно отфильтрованные образцы тестируются с помощью Cobetter Viruclear RC H при давлении 29 фунтов на квадратный дюйм
Результаты
→PDT+VF Plus, коэффициент извлечения 97,9%
→PNY+RC H, коэффициент извлечения 99,8%
Для удаления вирусов из рекомбинантного белка ЭПО рекомендуется использовать Cobetter Viruclear VF Plus для материалов с низкой концентрацией и низким уровнем загрязнения. Для материалов с высокой концентрацией белка и высоким уровнем загрязнения рекомендуется использовать фильтры Cobetter Viruclear VF Plus X или RC H для удаления вирусов.
Рекомендуется использовать нейлоновый предфильтр Cobetter Viruclear PNY для уменьшения ослабления потока в процессе фильтрации и глубинный фильтр PDT для усиления ослабления потока. Следует отметить, что глубинный фильтр обладает потенциальным адсорбционным эффектом, и на этапе разработки процесса необходимо оценить выход продукта в качестве ключевого фактора.
Безопасность в отношении вирусов, являющаяся главным приоритетом в производственном процессе биофармацевтической промышленности, также требует всесторонней оценки процесса их удаления. Компания Cobetter выпустила три продукта для фильтрации вирусов с помощью PES (полиэфирсульфона) и два продукта для фильтрации вирусов с помощью RC (регенерированной целлюлозы), оснащённые префильтрами для удаления вирусов, чтобы обеспечить безопасность биологических продуктов от вирусов.
В будущем мы будем постоянно совершенствовать и оптимизировать производственный процесс изготовления компонентов мембранной фильтрации для повышения эффективности и стабильности фильтрации. Мы стремимся предоставлять нашим клиентам решения для фильтрации с высокой производительностью и низкой стоимостью.